艾偉拓科普：常見(jiàn)緩沖液HEPES

緩沖溶液是許多生化反應、生產(chǎn)、實(shí)驗過(guò)程中的重要溶液，對穩定溶液的酸堿度有重要的影響。對于絕大多數生物制劑（如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等）而言，實(shí)驗操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內的生化反應等都需要在特定的pH值范圍內才能正常有效地進(jìn)行，從而得到準確的實(shí)驗結論或發(fā)揮好的治療效果。

HEPES就是這其中一款常用的緩沖液。

4-qiang乙基paiqin乙磺酸（簡(jiǎn)稱(chēng)HEPES），分子式為C8H18N2O4S。分子結構中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有兩個(gè)堿性叔胺氮，所以呈現兩性，可用來(lái)配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中，再用氫氧化鈉調節pH至適當值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對其pH值影響不大，因此能夠較長(cháng)時(shí)間維持穩定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現較強的酸性，易給出H+；兩個(gè)叔胺氮各含有一個(gè)孤對電子，呈現堿性，可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對。而且，單個(gè)HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內鹽，即兩性離子。在水溶液中，HEPES分子、內鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉移而能夠相互轉化建立平衡關(guān)系，憑借該平衡關(guān)系的移動(dòng)來(lái)抵御外來(lái)酸堿的影響來(lái)調節溶液pH值穩定，所以具有緩沖作用，其平衡轉化關(guān)系見(jiàn)下圖。

HEPES 緩沖溶液具有對細胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細胞內生化過(guò)程等特點(diǎn)，所以在生化實(shí)驗中具有廣泛的應用，如可用于開(kāi)放式細胞生長(cháng)、細胞的長(cháng)期觀(guān)察、RNA 或 DNA 提取試劑盒中。其次，相關(guān)研究表明以 HEPES 溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應。另外，HEPES 緩沖溶液對鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗表明，HEPES 能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。

具體應用方面，如鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液（Onivyde）。2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布，其胰腺癌治療藥物易安達（通用名：鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）獲得中國國家藥品監督管理局（NMPA）正式批準，與5-氟尿嘧啶（5-FU）和亞葉酸（LV）聯(lián)合用于治療接受吉西他濱治療后進(jìn)展的轉移性胰腺癌患者。伊立替康脂質(zhì)體注射液作為一款轉移性胰腺癌治療藥物，早前已在全球多個(gè)國家和地區獲批。更多信息詳見(jiàn)《易安達（鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）正式獲批！制劑處方，發(fā)展歷程及市場(chǎng)前景深度分析》